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PTPA对PP2AC+Y307磷酸募化程度的干用及其机制.pdf 全

作者:locoy 2019-07-27 15:58阅读:

  PTPA对PP2A Y307磷酸募化程度的干用及其机制

  C

  华语摘要

  阿尔茨海默病 (Alzheimer’s disease, AD)是壹种浸进性的记得丧权辱国和认知功

  能损伤的神物经数据字典,AD 患者脑内两父亲特点性病理学改触动是神物经元内结合

  微少量神物经原纤维缠结(neurofibrillary tangles, NFT),以及细胞间微少量老境斑(senile

  plaques, SP )的堆。就中,神物经原纤维缠结的首要成分是非日磷酸募化的tau蛋清。

  人体内拥有107个酪氨酸磷酸酯酶,就中PP2A属于PPP家族,在AD突发展开经过中

  发挥动要紧的磷酸酯酶干用,影响着tau的磷酸募化。PP2A催募化亚基的活性调理方法

  首要拥有:改触动PP2A 的表臻程度以及对PP2A 翻译后修饰——Leu309 甲基募化和

  C C

  Tyr307磷酸募化。PTPA是壹种普遍存放在于哺乳栽物布匹局和细胞的蛋清,PTPA却以

  经度过改触动PP2AC当空构象和添加以Leu309位点甲基募化程度到来增强大PP2A磷酸酯酶的

  活性,但对PP2A 的Tyr307位点磷酸募化程度能否存放在干用,当前尚不清楚。

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  目的:切磋PTPA对PP2A Tyr307位点磷酸募化程度的影响及其能机制。

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  材料和方法:构建PTPA 野生型质粒 (wt-PTPA )和特异性针对PTPA 基因

  前言列的RNA 烦扰质粒pSUPER-siPTPA (siPTPA ),区别转染入HEK293/tau 细胞

  系,蛋清避免疫印迹技术检测tau 蛋清即席点磷酸募化程度,检测与tau 磷酸募化相干

  的激酶、PP2AC 蛋清、PP2AC 去甲基募化、磷酸募化程度的变募化。用PP2A 活性试剂

  盒检测转染PP2A 活性变募化;用细胞避免疫荧光不清雅察PTPA 与tau 的磷酸募化位点的

  细胞共定位;用RT-PCR 方法检测PTP1B 转录程度变募化。

  结实:(1) wtPTPA拥有效地添加以了PTPA的表臻,pSUP -siPTPA拥有效地投降低了

  PTPA的表臻;(2 )293/tau细胞内度过表臻PTPA却以投降低tau磷酸募化程度,敲摒除PTPA

  使tau蛋清磷酸募化程度添加以;(3 )调控PTPA表臻程度却改触动PP2A活性,但对

  GSK-3没拥有拥有影响;(4 )OA却叛逆转度过表臻PTPA后对tau磷酸募化程度的投降低;(5 )

  度过表臻PTPA能投降低PP2A Y307磷酸募化程度;PTPA敲摒除后PP2A Y307磷酸募化程度

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  投降低;(6 )度过表臻PTPA能添加以PP2AC Y307位点磷酸酯酶PTP1B的转录和蛋清表

  臻程度;PTPA敲摒除后PTP1B的转录和蛋清表臻程度投降低,而其他惹宗PP2AC Y307

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